1、ELISA的原理：

（1）抗原或抗體能以物理性吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學活性;

（2）抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性;

（3）酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標準中相應抗原或抗體的量成一定比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示實驗結果。

2、ESISA的類型:

　  （1）雙抗夾心法(測微生物)：

基本原理：利用連接于固相載體上的抗體和酶標抗體分別與樣品中被檢測抗原分子上兩個抗原決定簇結合，形成固相抗體-抗原-酶標抗體免疫復合物，由于反應系統中固相抗體和酶標抗體的量相對于待測抗原是過量的，因此復合物的形成量與待測抗原的含量成正比(在方法可檢測范圈內),測定復合物中的酶作用于加入的底物后生成的有色物質量(OD值)，即可確定待測抗原含量。

   （2）間接法測抗體：

基本原理：將抗原連接到固相載體上，樣品中待測抗體與之結合成固相抗原-受檢抗體復合物，再用酶標二抗(針對案檢抗體的抗體，如羊抗人ICG抗體)與固相免疫復合物中的抗體結合，形成固相杭原-受檢抗體-酶栝二抗復合物，測定加底物后的顯色程度，測定待測抗體含量。

   （3）競爭法測抗原(化肥農藥)：

 基本原理：首先將特異性抗體吸附于固相載體表面(包被)，經洗滌后分成兩組：一組加酶標記抗原和被測抗原的混合液，而另一組只加酶標記抗原，標本中的抗原和一定量的酶標抗原競爭與固相抗體結會(標本中抗原量含量愈多，結含在固相上的酶抗原愈少，最后的顯色也愈淺)，再經孵育洗滌后加底物顯色，兩組底物降解量之差，即為我們所要測定的未知抗原的量。

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