黃曲霉毒素：

AF是一類化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的化合物，均為二氫呋喃環(huán)和香豆素的衍生物。目前已發(fā)現(xiàn)20多種。B1是最危險(xiǎn)的致癌物熒光特性：紫外線下B1 B2發(fā)藍(lán)色熒光G1G2發(fā)綠色熒光。

黃曲霉毒素AF的快速檢測技術(shù)：

免疫親和柱-熒光分光光度計(jì)法和免疫親和柱-HPLC法

(1)分析原理：

免疫親和柱試用大劑量的黃曲霉毒素的單克隆抗體固化在水不溶性的載體上，然后裝柱而成。試樣中AF用一定比例的甲醇/水提取，提取液經(jīng)過過濾稀釋后，用免疫親和柱凈化，以甲醇將親和柱上的黃曲霉毒素林洗下來，在淋洗液中加入溴溶液衍生，以提高測定靈敏度，然后用熒光分光光度計(jì)進(jìn)行定量。也可以將甲醇-黃曲霉毒素淋洗液的一部分加入HPLC中，對黃曲霉毒素B1B2G1G2分別進(jìn)行定量分析。

(2)ELISA法測定黃曲霉毒素B1原理：

將已知抗原吸附在固態(tài)載體表面，洗除未吸附抗原，加入一定量抗體與待測樣品提取液的混合液，競爭培養(yǎng)后，在固相載體表面形成抗原抗體復(fù)合物，洗除多于抗體成分，然后加入酶標(biāo)記對抗球蛋白的第二抗體結(jié)合物，與吸附在固體表面的抗原抗體復(fù)合物結(jié)合，再加入酶的底物。在酶催化下底物降解，產(chǎn)生有色物質(zhì)，通過酶標(biāo)檢測儀測出酶底物的降解量。推出被測樣品中抗原量。抗體：抗黃曲霉毒素B1的特異性單克隆抗體或抗血清包被抗原：黃B1與載體蛋白結(jié)合物酶標(biāo)二抗：羊抗鼠IgG與辣根過氧化酶結(jié)合物3.微柱篩選法：原理:樣品提取液通過由氧化鋁與硅鎂吸附劑組成的微柱層析管，雜質(zhì)被氧化鋁吸附，黃曲霉毒素被硅鎂吸附劑吸附，在波長365nm紫外燈下顯示藍(lán)紫色熒光環(huán)，其熒光強(qiáng)度與黃曲霉毒素在一定的濃度范圍內(nèi)成正比例關(guān)系.若硅鎂型吸附層未出現(xiàn)藍(lán)紫色熒光，則樣品為陰性(方法靈敏度為5~10ug/kg)。由于在微柱上不能分離黃曲霉毒素B1，B2，GI，G2，所以測得結(jié)果為總黃曲霉毒素含量。

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