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柱后衍生系統(tǒng)又添新應(yīng)用--河豚毒素檢測(GB 5009.206-2016)

2021-03-18

  去年游族創(chuàng)始人遭人投毒致死,英年早逝令人惋惜。據(jù)某些報道稱其中的毒之一就是河豚毒素。像這樣的河豚毒素中毒事件在日常生活中也有發(fā)生。近日,廣東省衛(wèi)健委通報的廣東三起較大級別的食物中毒事件中,其中兩起為河豚毒素中毒,且中毒兩人均死亡。

什么是河豚毒素呢

  河豚毒素(tetrodotoxin,TTX),分子式為C11H17O8N3,是鲀魚類(俗稱河豚魚)及其它生物體內(nèi)含有的一種生物堿。

  河豚毒素為氨基全氫喹唑啉型化合物,是自然界中所發(fā)現(xiàn)的毒性最大的神經(jīng)毒素之一,曾一度被認為是自然界中毒性最強的非蛋白類毒素。這種毒素主要作用于腸道,被腸道吸收后便會迅速作用于神經(jīng)末梢和神經(jīng)中樞,可高選擇性和高親和性地阻斷神經(jīng)興奮膜上鈉離子通道,阻礙神經(jīng)傳導(dǎo),從而引起神經(jīng)麻痹而致死亡。

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  據(jù)調(diào)查顯示,河豚毒素大部分存在于河豚當(dāng)中,但是近幾年在蟾蜍、蠑螈、藍環(huán)章魚中也檢測到河豚毒素的存在。越來越多的研究認為,河豚毒素有可能是通過食物鏈傳播到海洋生物體內(nèi)的,并不只和河豚有關(guān)。

  河豚體內(nèi)的毒性在各個部位不同,甚者季節(jié)也會影響河豚體內(nèi)的毒性。據(jù)研究顯示,河豚在生殖季節(jié)毒性大,且雌性大于雄性,而在不同部位中,卵巢>脾臟>肝臟>血液>眼睛>鰓耙>皮膚>精巢。一般情況下,河豚的肌肉中是不含有毒素的,但河豚死后內(nèi)臟中的毒素可少量地滲入肌肉中。

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  河豚毒素化學(xué)性質(zhì)和熱性質(zhì)均很穩(wěn)定,一般家庭中的烹飪條件不能將其破壞,只有在高溫加熱30min以上或在堿性條件下才能被分解。而能將其破壞的條件要求較高,為220℃加熱20-60min。這種的毒素的發(fā)病期很短,短至10-30min,長至3-6h發(fā)病,發(fā)病急,如果搶救不及時,中毒后最快的10min內(nèi)死亡,最遲4-6h死亡。中毒后也缺乏有效的解救措施。所以,對于河豚毒素的檢測尤為重要。

方法介紹

  目前食品中河豚毒素的檢測主要依據(jù)GB 5009.206-2016,包括小鼠生物法、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、液相色譜-熒光檢測法和酶聯(lián)免疫吸附法。其中小鼠生物法雖為世界普遍的參考方法,但存在小鼠個體差別大導(dǎo)致結(jié)果異常的現(xiàn)象;液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法儀器成本高,對操作人員水平要求嚴(yán)格;酶聯(lián)免疫吸附法屬于半定量方法且商品化試劑盒較少;故采用液相色譜-熒光檢測法。

  為保證檢測結(jié)果更加精準(zhǔn)可靠,普瑞邦特對該方法進行優(yōu)化,采用諾爾液相搭配Pribolab?MDS多功能光電衍生系統(tǒng)進行河豚毒素的檢測。經(jīng)液相色譜分離后,河豚毒素在Pribolab?MDS多功能光電衍生系統(tǒng)內(nèi)與高溫的氫氧化鈉溶液反應(yīng),生成具有強熒光效應(yīng)的C9堿,熒光檢測定量限為300ppb,滿足國標(biāo)要求。

實驗條件

  • 色譜柱: C 18 柱,柱長 150mm ,內(nèi)徑 4. 6mm ,粒徑 5 μ m ,或等效柱。

  • 流動相:乙腈 - 乙酸銨緩沖液( 5+95 ,體積比)。

  • 流速: 1. 0mL / min 。

  • 柱溫: 30℃ 。

  • 檢測波長:激發(fā)波長 385nm ,發(fā)射

    波長 505nm 

注:如需優(yōu)化后的方法,請與我們聯(lián)系


譜圖

圖片

上圖為1ppm河豚毒素柱后衍生產(chǎn)物熒光譜圖

耗材加油站

產(chǎn)品編號/貨號

名稱

型號/規(guī)格

PR-185150

C18色譜柱

15cm*4.6mm*5um

IAC-M10-3

河豚毒素免疫親和柱

25/50T

STD#M009

河豚毒素標(biāo)準(zhǔn)品

20ug/mL

EQ-EVP 3024

Pribolab?真菌毒素濃縮器

EQ-EVP24

EQ-MDS2010/2020

Pribolab?MDS多功能光電衍生系統(tǒng)

MDS-3000/3100

MSS3009

Pribolab?河豚毒素

1mg


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